狠狠色综合一区二区中文字幕激情电影院_边缘控制玩到哭的感受_不卡乱辈伦在线看中文字幕_大一新生国产对白正在播放_韩国精品无码一区二区三区

產(chǎn)品中心您現(xiàn)在的位置:首頁 > 產(chǎn)品展示 > 食品農(nóng)殘檢測 > 食品酶免試劑盒 > 磺胺三合一檢測試劑盒

磺胺三合一檢測試劑盒

更新時間:2016-11-04

簡要描述:

磺胺三合一檢測試劑盒的服務(wù)和業(yè)務(wù)在同行獲得*好評,其立足于生命科學(xué)領(lǐng)域,全力打造高品質(zhì)生物科技產(chǎn)品鏈和技術(shù)服務(wù)鏈,也具備豐富的管理經(jīng)驗,同時我們建立了集、售后服務(wù)等多方位的服務(wù)體系,有激情、有理想,更有責(zé)任感,是您科研道路上值得信賴的伙伴。

  免費咨詢:021-54845833

  發(fā)郵件給我們:2881498548@qq.com

磺胺三合一檢測試劑盒使用說明書(酶聯(lián)免疫法) 


磺胺三合一檢測試劑盒原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測組織、血清、蜂蜜、牛奶、尿液等樣本中的磺胺類藥物(Sulfonamides,SAs),試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,樣本中的磺胺類藥物和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗磺胺類藥物抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含磺胺類藥物含量成負相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中磺胺類藥物的殘留量。
2 技術(shù)指標(biāo)
2.1 試劑盒靈敏度:0.2ppb(ng/ml)
2.2 反應(yīng)模式:25℃,45min~15min
2.3 檢測下限:
組織(高檢測限方法)……………………0.2ppb
組織(低檢測限方法)……………………2ppb
血清、尿液、雞蛋………………………0.8ppb
蜂蜜………………………………………0.2ppb
牛奶………………………………………4ppb
飼料………………………………………8ppb
2.4 交叉反應(yīng)率:

藥物名稱

交叉率

靈敏度

磺胺甲基異噁唑(SMZ)

100%

0.2ppb

磺胺間甲氧嘧啶(SMM)

67%

0.3ppb

磺胺嘧啶(SD或SDZ)

33%

0.6ppb

 

 2.5 樣本回收率:
組織、蜂蜜、雞蛋………………………………85±25%
尿樣、牛奶、血清、飼料………………………80±25%
3 試劑盒組成
酶標(biāo)板……………………………96孔
標(biāo)準(zhǔn)液:各1ml
0ppb、0.2ppb、0.6ppb、1.8ppb、5.4ppb、16.2ppb
高標(biāo)準(zhǔn)液(紅蓋):1ppm…………1ml
酶標(biāo)記物(紅蓋)…………………5.5ml
抗體工作液(藍蓋)………………5.5ml
底物液A(白蓋)……………………6ml
底物液B(黑蓋)……………………6ml
終止液(黃蓋)………………………6ml
20X濃縮洗滌液(白蓋)……………40ml
2X復(fù)溶液(黃蓋)…………………50ml
說明書………………………………1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器:酶標(biāo)儀、打印機、均質(zhì)器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl、多道300µl
4.3 試劑:乙酸乙酯、正己烷、乙腈、Na2HPO4·12H2O、NaOH 、濃HCl、NaH2PO4·2H2O 
5 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知:
實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實驗結(jié)果。
5.2 配液:
配液1:0.1M  磷酸鹽緩沖液
    稱取25.8g Na2HPO4·12H2O和4.4g NaH2PO4·2H2O加去離子水1000ml溶解。
配液2:乙腈-乙酸乙酯溶液
    取50ml乙腈和50ml乙酸乙酯加入100ml玻璃瓶中,混勻。
配液3:0.5M鹽酸溶液
    4.3ml濃HCl加入去離子水定容至100ml混勻。
配液4:0.2M  NaOH溶液
    0.8gNaOH用去離子水100ml溶解
配液5:復(fù)溶液
    將2×復(fù)溶液用去離子水2倍稀釋,用于樣本的復(fù)溶,復(fù)溶液在4℃環(huán)境可保存一個月。
5.3 樣本前處理步驟:
5.3.1 組織樣本(高檢測限)處理方法
1)稱取2±0.05g均質(zhì)組織樣本置離心管中,加入1ml 0.1M磷酸鹽緩沖溶液,用渦旋儀渦動樣本成糊狀,加入7ml乙腈-乙酸乙酯溶液,振蕩2min,室溫4000r/min以上離心5min;
2)移取4ml上層清澈有機相至干燥容器中,在50-60℃氮氣或空氣吹干;
3)加入1ml正己烷溶解干燥的殘留物,加入樣本復(fù)溶液1ml。振蕩混合30s,室溫4000r/min以上離心5min;
4)去除上層正己烷,取50µl下層水相用于分析。  
    樣本稀釋倍數(shù):1    檢測下限:0.2ppb
5.3.2 組織樣本(低檢測限)處理方法
1)稱1.0±0.05g 均質(zhì)組織樣本于離心管中;加入9ml 0.1M 磷酸緩沖液,震蕩5min,室溫4000r/min以上離心5min; 
2)取50µl上層液體用于分析。
    樣本稀釋倍數(shù): 10    檢測下限:2ppb  
5.3.3 雞蛋樣本處理方法
1)用均質(zhì)器均質(zhì)雞蛋樣本,使蛋清和蛋黃充分混合;
2)稱取2.0±0.05g均質(zhì)后的雞蛋樣本(蛋粉1g加3ml去離子水混勻后取2ml相當(dāng)于2g鮮雞蛋)至50ml離心管中,加入8ml乙腈,立即用振蕩器振蕩10min,室溫4000r/min以上離心5min;
3)移取1ml上清液至10ml潔凈干燥玻璃試管中于,在50-60℃氮氣或空氣吹干;
4)加入1ml正己烷,用渦旋儀渦動30s溶解干燥的殘留物,再加入1ml復(fù)溶工作液,用渦旋儀渦動1min,室溫4000r/min以上離心5min;
5)去上層有機相,取下層水相50ul用于分析。
    樣本稀釋倍數(shù): 4    檢測下限:0.8ppb  
5.3.4 血清樣本處理方法 
1)將血樣本于室溫放置30min,室溫4000r/min以上離心10min,分離出血清或過濾血清;
2)取1ml血清,加入3ml 0.1M PB緩沖液混合,混合30s;
3)取50µl用于分析。  
    樣本稀釋倍數(shù):4    檢測下限:0.8ppb
5.3.5 蜂蜜樣本處理方法
1)稱取1±0.05g蜂蜜樣本于50ml離心管中,加入1ml 0.5M鹽酸置于37℃環(huán)境中30min;
2)加入2.5ml 0.2M 氫氧化鈉 (將PH值調(diào)至5左右)再加入4ml乙酸乙脂振蕩5min,4000r/min以上室溫離心5min;
3)取2ml上層液體于50℃下氮氣吹干,加0.5ml 已稀釋好的復(fù)溶液復(fù)溶,混合30s;
4)取50µl用于分析。  
    樣本稀釋倍數(shù):1    檢測下限:0.2ppb
5.3.6 尿樣本處理方法
1)用3ml 0.1M PB緩沖液與1ml經(jīng)離心后的清亮尿樣本混合,混合30s; 
2)取50µl液體用于分析。  
    樣本稀釋倍數(shù): 4    檢測下限:0.8ppb 
5.3.7 牛奶樣本處理方法
1)取100ul牛奶樣本用0.1M PB緩沖液按1︰19(v/v)稀釋(即100ul牛奶+1.9ml 0.1M PB緩沖液),混合30s;
2)取50µl用于分析。  
    樣本稀釋倍數(shù):20    檢測下限:4ppb     
5.3.8 飼料樣本處理方法
1)稱取2.0±0.05g飼料樣本至50ml聚苯乙烯離心管中,加入8ml乙腈,振蕩5min,室溫4000r/min以上離心5min;
2)移取1ml上層有機相至10ml潔凈干燥玻璃試管中,在50-60℃氮氣或空氣吹干;
3)加入1ml正己烷,用渦旋儀渦動30s,再加入1ml 0.1M磷酸鹽緩沖溶液,用渦旋儀渦動30s混勻,轉(zhuǎn)入2ml聚苯乙烯離心管中,室溫4000r/min以上離心5min;
4)除去上層有機相,移取100ul下層水相至2ml離心管中,加入 900ul 0.1M磷酸鹽緩沖溶液,用渦旋儀渦動1min,混勻;
5)取50ul用于分析。
   樣本稀釋倍數(shù):40    檢測下限:8ppb
酶聯(lián)免疫試驗步驟
    將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
實驗開始前,用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。
6.1 編    號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
6.2 加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶標(biāo)記物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應(yīng)45分鐘。
6.3 洗    滌:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
6.4 顯    色:每孔加入底物液A 50µl,再加底物液B 50µl,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘。
6.5 終    止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。
6.6 測吸光值:用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。
7 結(jié)果分析
7.1 百分吸光率的計算
    標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以*個標(biāo)準(zhǔn)液(0ppb)的吸光度值,再乘以100%,即
 百分吸光度值(%)=
A
×100%
A0
A—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值
A0—0ppb標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值
7.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計算
    以標(biāo)準(zhǔn)液百分吸光率為縱坐標(biāo),對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)液濃度(ppb)的對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)液的半對數(shù)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中待測物的實際濃度。
    若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進行計算,更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。(索?。?br />8 注意事項
8.1 室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫(25℃)會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
8.2 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。
8.3 混合要均勻,洗板要*,在ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的*性。
8.4 在所有孵育過程中,用蓋板膜封住微孔板,避免光線照射。
8.5 不要使用過了有效期的試劑盒,不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
8.6 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個單位(A450nm< 0.5 )時,表示試劑可能變質(zhì)。
8.7 反應(yīng)終止液有腐蝕性,避免接觸皮膚。
貯藏及保存期
儲藏條件:試劑盒于2-8℃保存,避免冷凍。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。

留言框

  • 產(chǎn)品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯(lián)系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細地址:

  • 補充說明:

  • 驗證碼:

    請輸入計算結(jié)果(填寫阿拉伯?dāng)?shù)字),如:三加四=7
上海通蔚生物科技有限公司

上海通蔚生物科技有限公司

地址:上海市金山區(qū)楓涇鎮(zhèn)環(huán)東一路65弄2號3463室

主營產(chǎn)品:ELISA檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

©2019 版權(quán)所有:上海通蔚生物科技有限公司  備案號:滬ICP備14033764號-3  總訪問量:1061005  站點地圖  技術(shù)支持:環(huán)保在線  管理登陸